注意事項(xiàng):
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣
英文名稱：Milker's Nodule Virus(MNV)PCR
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
3-羥基苯/間甲醛苯酚/2-羥基-4-甲硫基丁酸/蛋氨酸羥基類似物/3-HydroxybenzaldehydeBR，97%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，100-83-4RT，避光

4-羥基苯苯酚/對(duì)苯酚甲酸/對(duì)羥基安息香酸/尼泊金酸/甲醛基苯酚/對(duì)羥基苯醛/對(duì)苯酚甲醛/PHBACP100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，123-08-0RT

2-硝醛/2-NitrobenzaldehydeAR，99%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌， 552-89-6RT

3-硝基NitrobenzaldehydeCP，98%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，99-61-6RT

4-硝基苯-NitrobenzaldehydeAR，99%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，555-16-8RT

鄰苯二甲醛/鄰苯二醛/酞醛/1,2-苯二甲醛/1,2-苯二醛/鄰酞醛醛鄰羧酸/苯醛酸/OPACP10克國產(chǎn)643-79-82～8℃，避光

對(duì)苯二甲醛/對(duì)酞醛/1,4-苯二甲醛/p-PhthalaldehydeCP10克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，623-27-8RT，避光

丙酮醛/甲基乙二醛/2-氧代丙醛/酮丙醛/焦性葡萄醛/2-氧丙醛/2-側(cè)氧丙醛/MethylglyoxalBR，32%250毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，78-98-8RT

十一醛/正十一醛/十一碳醛/UndecanalBR，97%25毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，112-44-7RT

藜蘆醛/焦兒茶醛二甲醚/綠藜蘆醛/香草醛甲醚/香蘭素甲醚/甲基香蘭素/3,4-二甲氧基醛3,4-DimethoxybenzaldehydeAR，98%100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，120-14-9RT

香蘭素/香草醛/香莢蘭醛/凡尼林/香莢蘭素/3-甲氧基-4/4-羥基-3-甲氧基醛/VanillinAR，99.5%100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，121-33-5RT，避光

鉬酸鈉/二水合鉬酸鈉/Sodium molybdate dihydrateAR，99%250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，10102-40-6RT

酚酞二磷酸四鈉鹽/Phenolphthalein bisphosphate tetrasodium saltBR，95%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，68807-90-9保存：-20℃

無水磷酸肌酸二鈉鹽/無水磷酸肌酸鈉鹽/肌酸磷酸鈉鹽/磷酸肌肉素二鈉/Creatine phosphate sodium salt高純，97%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，922-32-72～8℃
擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣2,2-BIS[4-(2-HYDROXY-3-METHACRYLOXYPROPOXY)PHENYL]PROPANE 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,BR

Dimethylbisdiphenylphosphinoxanthene 質(zhì)量規(guī)格：滴定法≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品

Semixylenol orange 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Chromic nitrate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Piperazine-N,N'-bis(2-hydroxypropanesulphonic acid) disodium salt 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

D(-)-Asparagine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品

4-Methylphenethylamine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

GLYCOCHENODEOXYCHOLIC ACID SODIUM SALT 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品