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    組織切片中脫水和透明

    點(diǎn)擊次數(shù):948  更新時間:2015-09-28

    脫水和透明

        所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來,以利于有機(jī)溶劑的滲入,這一過程稱為脫水。脫水是否*,直接關(guān)系到組織是否能充分透明,而脫水過度(原因是組織在純酒精內(nèi)時間過久,發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化)容易造成組織發(fā)脆。造成組織發(fā)脆的原因還有加溫(溫度超過35℃)、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟中二甲苯過多等等。ELISA試劑盒

        一般我們總認(rèn)為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān),而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系,其實(shí)低濃度的酒精具有強(qiáng)大的穿透力,比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水,組織如果在低濃度酒精里充分脫水,在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份,因此,僅需短時間就可完成,如果這時不縮短純酒精的時間,便會引起組織發(fā)脆;如果脫水時加溫,使用丙酮,還可引起組織收縮,并影響免疫組織化學(xué)的標(biāo)記。

        為了使石蠟浸入到組織塊內(nèi),必須經(jīng)過一種既能與脫水劑混合,又能與石蠟相溶的媒介物質(zhì),這個過程稱透明。目前的透明劑是二甲苯。很多人認(rèn)為二甲苯極容易使組織發(fā)脆,這個觀點(diǎn)很片面,在常溫下,如果不是時間過長(超過24小時以上)二甲苯并不會引起組織過份發(fā)脆,相反會使某些組織結(jié)構(gòu)比較質(zhì)韌的組織:比如子宮肌瘤等相當(dāng)好切),但是當(dāng)二甲苯溫度超過35℃以后,極易引起組織發(fā)脆。所以本人認(rèn)為,大小標(biāo)本分開脫水,一般情況下,大標(biāo)本脫水時間(室溫18℃)以80%酒精2小時、95%酒精(2道)各1個半小時至2小時、純酒精(3道)各1個半小時至2小時,二甲苯(2道)各30-60分鐘為宜;小標(biāo)本脫水時間應(yīng)相應(yīng)縮短。ELISA試劑盒

        脫水時間長短,與室溫高低有密切的相關(guān)。我們在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn),室溫在12~15℃時,可作為一個臨界溫度范圍。當(dāng)室溫高于此溫度范圍時,組織容易脫水,可適當(dāng)縮短脫水時間;而室溫低于該溫度范圍時,應(yīng)適當(dāng)延長脫水時間(如能保證在一個恒定的溫度下)。更換試劑,應(yīng)以量為基礎(chǔ),定量更換,不能等到切片不好時再去更換。否則,至少會有2~3批組織切片不好。根據(jù)我科經(jīng)驗(yàn),如試劑用量為500ml,每500個蠟塊更換一次為宜。ELISA試劑盒

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